增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥幼苗基因組DNA的影響及RAPD分析體系的建立

采用改進(jìn)的CTAB法提取小麥總基因組DNA,并以之為模板對(duì)RAPD反應(yīng)體系中的一些重要參數(shù)進(jìn)行梯度試驗(yàn),建立了一套適合本研究的最佳反應(yīng)體系.即25 μL反應(yīng)體系:模板DNA 20 ng、引物濃度0.5 μmol/L、dNTPs 濃度200 μmol/L、Taq酶0.750 U.反應(yīng)程序:94℃預(yù)變性2 min,94℃變性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸30 s,30個(gè)循環(huán),72℃延伸10 min,4℃保存.此外,利用擴(kuò)增結(jié)果穩(wěn)定的引物對(duì)正常光照組及增強(qiáng)UV-B輻射處理組的小麥DNA進(jìn)行RAPD分析.結(jié)果表明,增強(qiáng)UV-B輻射處理組的DNA,經(jīng)引物S22、S40擴(kuò)增后分別出現(xiàn)了分子量為2 144 bp和2 082 bp的差異條帶,這能否從一定程度上揭示UV-B對(duì)植物造成損傷的分子生物學(xué)機(jī)制,還有待進(jìn)一步的研究.

作 者： 李苗 高麗美 李永鋒 韓榕   作者單位： 山西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,臨汾,041004  刊 名： 生物技術(shù)通報(bào)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(5)  分類號(hào)：   關(guān)鍵詞： 小麥   UV-B輻射   CTAB法   RAPD分析   差異條帶  

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