hIL-10在大腸桿菌中的表達及其生物學活性鑒定

構建了含有人白細胞介素-hIL-10(Human Interleukin 10,hIL-10)基因的重組質粒,在大腸桿菌中的高效表達,并對其生物學活性進行了鑒定.用RT-PCR擴增hIL-10 cDNA,并插入原核表達載體PET-32b.將重組質粒轉入BL21(DE3)感受態(tài)細胞,在37℃用IPTG誘導hIL-10表達.表達的重組蛋白經復性純化后,用夾心ELISA法檢測其對外周血單核細胞(PBMC)合成IFN-γ的抑制作用.重組質粒PET-32b/hIL-10的DNA序列分析顯示,克隆的DNA序列和文獻報道的hIL-10 cDNA序列一致.SDS-PAGE表明,重組蛋白相對分子質量為18 000.活性測定結果顯示,重組蛋白能顯著抑制PBMC合成IFN-γ.這表明構建的PET-32b/hIL-10可以在大腸桿菌中高效表達,經復性和純化后,獲得了具有高純度和活性的hIL-10.

作 者： 王旻東 孫自勇 陳俊勇 吳盛 智強 劉建寧 Wang Mindong Sun Ziyong Chen Junyong Wu Sheng Zhi Qiang Liu Jianning   作者單位： 王旻東,Wang Mindong(南京市公安局刑警支隊,江蘇,南京,210012)

孫自勇,陳俊勇,吳盛,智強,劉建寧,Sun Ziyong,Chen Junyong,Wu Sheng,Zhi Qiang,Liu Jianning(南京大學分子醫(yī)學研究所,江蘇,南京,210093) 

刊 名： 南京師大學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 29(3)  分類號： Q78  關鍵詞： 人白細胞介素-10(hIL-10)   克隆   表達   大腸桿菌   生物學活性   夾心ELISA  

【hIL-10在大腸桿菌中的表達及其生物學活性鑒定】相關文章：

反問句的幾種形式及其表達作用12-19

詩歌中的表達技巧教案09-25

畢業(yè)鑒定中的自我鑒定12-28

原創(chuàng)：四中小課題開題報告及其點評04-27

2012考研數(shù)學 加強解題靈活性04-28

電氣工程及其自動化自我鑒定03-12

電氣工程及其自動化自我鑒定12-15

英語面試中五大典型問題及其回答技巧05-04

簡歷中的自我鑒定08-07

英漢表達差異—英語寫作中的攔路虎05-04