雞CD3γδ基因cDNA的克隆及其真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建

用Trizol提取4～6周齡白萊航雞、伊莎雞、固始雞和隱性白羽雞胸腺組織的總RNA,再用Oligo-dT纖維素富集mRNA后,用RT-PCR擴(kuò)增出雞CD3γδ基因cDNA.PCR產(chǎn)物切膠回收后連入T載體,序列分析發(fā)現(xiàn)伊莎雞、固始雞和隱性白羽雞的CD3γδ cDNA比白萊航雞多一個(gè)氨基酸,且在胞外區(qū)的一個(gè)區(qū)域有4個(gè)氨基酸的差異.將白萊航雞的CD3γδ從T載體上切下連入pcDNA3.1(+),再將重組質(zhì)粒pcDNA3.1-CD3轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞,用已知的抗雞CD3的單克隆抗體測(cè)得轉(zhuǎn)染細(xì)胞中CD3γδ分子的表達(dá),這說(shuō)明構(gòu)建的真核表達(dá)質(zhì)粒正確,為下一步用DNA免疫的手段研制抗雞CD3的單克隆抗體以及研究雞CD3分子的結(jié)構(gòu)和功能打下了基礎(chǔ).

作 者： 胡青海 焦新安 徐耀輝 張小燕 潘志明 黃金林 殷月蘭 HU Qing-hai JIAO Xin-an XU Yao-hui ZHANG Xiao-yan PAN Zhi-ming HUANG Jin-lin YIN Yue-lan   作者單位： 揚(yáng)州大學(xué),江蘇,揚(yáng)州,225009  刊 名： 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE  年，卷(期)： 2006 28(2)  分類號(hào)： Q785  關(guān)鍵詞： 雞   CD3   cDNA   真核表達(dá)  

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