大豆類受體蛋白激酶基因(rlpk2)RNAi雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因

植物類受體蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的結(jié)構(gòu)在植物的生長(zhǎng)、發(fā)育和防御等多種生理生化過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用.利用RNA干擾技術(shù)(RNA interference RNAi)來(lái)研究RLKs的功能已日趨成熟.本文根據(jù)植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以大豆類受體蛋白激酶基因rlpk2為靶基因,在rlpk2-cDNA序列3'端選擇312bp作為構(gòu)建RNAi的序列,借助中間克隆載體,經(jīng)過(guò)三次亞克隆,最后形成含rlpk2-RNAi表達(dá)盒的雙元表達(dá)載體pART27-R2,并轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌LBA4404.采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化方法,共獲得了三株轉(zhuǎn)基因植株.轉(zhuǎn)基因植株RT-PCR分析表明rlpk2基因已被成功敲減(knock-down),并且發(fā)現(xiàn)敲減大豆葉片中的rlpk2基因表達(dá)明顯改善大豆葉片的光合能力,結(jié)合前期研究結(jié)果,表明rlpk2基因可能在維持葉綠體的結(jié)構(gòu)及保護(hù)葉綠體膜系統(tǒng)的完整性方面起負(fù)調(diào)節(jié)作用.

作 者： 李小平 鄧楠 馬媛媛 李鵬麗 王勇 張韌 王寧寧 LI Xiao Ping DENG Nan MA Yuan Yuan LI Peng Li WANG Yong ZHANG Ren WANG Ning Ning   作者單位： 李小平,鄧楠,馬媛媛,李鵬麗,王勇,王寧寧,LI Xiao Ping,DENG Nan,MA Yuan Yuan,LI Peng Li,WANG Yong,WANG Ning Ning(南開(kāi)大學(xué),植物生物學(xué)及生態(tài)學(xué)系,天津,300071)

張韌,ZHANG Ren(Department of Biological Sciences,University of Wollongong,NSW2522,Australia) 

刊 名： 分子細(xì)胞生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF MOLECULAR CELL BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 39(1)  分類號(hào)： Q2  關(guān)鍵詞： 大豆   類受體蛋白激酶   RNAi   雙元表達(dá)載體  

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