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慢病毒載體介導的RNA干擾抑SUPC12細胞MyD88基因的表達
目的 研究慢病毒介導的RNA干擾對PC12細胞的轉(zhuǎn)染效率和對MyD88基因的抑制效率.方法 構建針對大鼠MyD88基因3個靶點的ShRNA慢病毒載體,PC12細胞按照不同的轉(zhuǎn)染條件分為正常組(DMEM完全培養(yǎng)液)、DMEM加入polybrene組、EN.iS(Enhance infection solution)組、EN.iS加入polybrene組.熒光顯微鏡下觀察不同組的轉(zhuǎn)染效率,采用Real-time PCR和Western blot檢測不同的靶點對MyD88的不同沉默效率.結果 病毒滴度為1×108 TU/ml,MOI為100時,PC12細胞在EN.iS組的轉(zhuǎn)染效率最高,轉(zhuǎn)染試劑polybrene對轉(zhuǎn)染效率無明顯影響,沉默效率最高的靶點是5'-CATAC GCAACCAGCAGAAA-3''.結論 慢病毒介導的RNA干擾是一種高效的基因沉默手段,可以對PC12細胞中MyD88的功能進行長期的研究.
作 者: 崔萬鵬 劉曉湘 方秀斌 CUI Wan-peng LIU Xiao-xiang FANG Xiu-bin 作者單位: 中國醫(yī)科大學,基礎醫(yī)學院神經(jīng)生物學教研室,遼寧,沈陽,110001 刊 名: 解剖科學進展 ISTIC 英文刊名: PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES 年,卷(期): 2010 16(2) 分類號: Q189 關鍵詞: PC12細胞 慢病毒 RNA干擾 髓樣分化因子初次應答基因88【慢病毒載體介導的RNA干擾抑SUPC12細胞MyD88基因的表達】相關文章:
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