負(fù)載hTERT復(fù)制缺陷型腺病毒的包裝及鑒定

目的: 構(gòu)建負(fù)載人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)基因的復(fù)制缺陷型腺病毒.方法: 將克隆有正義hTERT cDNA的腺病毒穿梭質(zhì)粒pDC315-hTERT與腺病毒包裝質(zhì)粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共轉(zhuǎn)染人胚腎293細(xì)胞(HEK 293), 包裝負(fù)載hTERT基因的復(fù)制缺陷型腺病毒表達(dá)載體(Ad-hTERT). 對(duì)Ad-hTERT擴(kuò)增、純化并濃縮后,進(jìn)一步行感染性鑒定、電鏡鑒定及雙引物PCR鑒定. 結(jié)果: 純化濃縮后的Ad-hTERT滴度可達(dá)5×1012 pfu/L. 電鏡下可見在HEK 293細(xì)胞中形成的病毒顆粒,PCR雙引物鑒定Ad-hTERT可擴(kuò)增出Ad及hTERT特異片段,而對(duì)照則不能擴(kuò)出hTERT片段. 結(jié)論: 成功構(gòu)建了負(fù)載hTERT基因的復(fù)制缺陷型腺病毒.

作 者： 陳陵 向國(guó)春 李向紅 蔡永國(guó) 李晶晶 房殿春 羅元輝 李志宏 楊仕明 CHEN Ling XIANG Guo-Chun LI Xiang-Hong CAI Yong-Guo LI Jin-Jin FANG Dian-Chun LUO Yuan-Hui LI Zhi-Hong YANG Shi-Ming   作者單位： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍消化中心,重慶,400038  刊 名： 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 27(1)  分類號(hào)： Q756 Q753  關(guān)鍵詞： 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶   腺病毒表達(dá)載體  

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