枸杞中IPP異構(gòu)酶相關(guān)基因(IPI)的分離

以寧夏枸杞葉片為材料,采用異硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的總RNA,利用PolyATract mRNA I-solation System(Promega公司)分離mRNA,然后利用Universal RibocloneRcDNA Synthesis System(Promega公司)合成雙鏈cDNA,在cDNA末端連接上EcoR Ⅰ接頭,并與λExCell載體連接,利用PackageneLambda DNA Packaging System進(jìn)行包裝,構(gòu)建出滴度為2.78×105pfu/mL,重組效率為88.1%的枸杞葉片cDNA文庫(kù).用Digoxigenin(DIG)標(biāo)記龍膽草IPI探針,并對(duì)枸杞葉片cDNA文庫(kù)進(jìn)行篩選,獲得7個(gè)IPIcDNA陽(yáng)性克隆.釋放質(zhì)粒后,進(jìn)行酶切鑒定,IPI陽(yáng)性克隆cDNA插入片段的大小為1.5kb左右.

作 者： 張愛(ài)香 季靜 王罡 抗艷紅 ZHANG Ai-xiang JI Jing WANG Gang KANG Yan-hong   作者單位： 張愛(ài)香,ZHANG Ai-xiang(河北北方學(xué)院農(nóng)學(xué)系,河北,張家口,075131;天津大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院,天津,300072)

季靜,王罡,JI Jing,WANG Gang(天津大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院,天津,300072)

抗艷紅,KANG Yan-hong(河北北方學(xué)院農(nóng)學(xué)系,河北,張家口,075131) 

刊 名： 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA  年，卷(期)： 2006 15(3)  分類號(hào)： Q784  關(guān)鍵詞： 枸杞   葉片   cDNA文庫(kù)   IPI   基因   分離  

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