人血管內(nèi)皮生長因子和端粒酶催化亞基復(fù)合調(diào)控序列的構(gòu)建及轉(zhuǎn)錄活性的研究

以人肝癌細胞基因組DNA為模板,應(yīng)用PCR方法擴增VEGF增強子和hTERT核心啟動子序列,該序列與NCBI數(shù)據(jù)庫參考序列相比,同源性達到99%以上.將VEGF增強子和hTERT核心啟動子定向克隆到pBluescript Ⅱ SK載體中,構(gòu)建VEGF增強子和hTERT核心啟動子復(fù)合調(diào)控序列.酶切去除表達載體pECFP-C1的啟動子CMV,并將所制備的復(fù)合調(diào)控序列連接到CMV位置,構(gòu)建含該復(fù)合調(diào)控序列并可表達綠色熒光蛋白報告基因的重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染人肺癌細胞和正常人肝細胞.結(jié)果顯示,在人肺癌細胞中觀察到綠色熒光,而在人肝細胞中沒有檢測到.由此說明,具有腫瘤特異性的VEGF增強子和hTERT核心啟動子復(fù)合轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列可以驅(qū)動綠色熒光蛋白基因在人肺癌細胞中表達,但不能驅(qū)動該蛋白在正常人肝細胞中表達.

作 者： 胡薇 郝軍元 艾永興 張英波 張玉靜 HU Wei HAO Jun-yuan AI Yong-xing ZHANG Ying-bo ZHANG Yu-jing   作者單位： 胡薇,HU Wei(吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部畜牧獸醫(yī)學(xué)院動物生物技術(shù)系,長春,130062;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院,長春,130118)

郝軍元,艾永興,張英波,張玉靜,HAO Jun-yuan,AI Yong-xing,ZHANG Ying-bo,ZHANG Yu-jing(吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部畜牧獸醫(yī)學(xué)院動物生物技術(shù)系,長春,130062) 

刊 名： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF JILIN AGRICULTURAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 28(2)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： VEGF增強子   hTERT核心啟動子   綠色熒光蛋白   表達  

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