克魯維酵母中外切菊粉酶基因在畢赤酵母中的表達研究

用PCR的方法從克魯維酵母(Kluyveromyces marxianus)ATCC12424中克隆出外切菊粉酶基因.將該基因克隆到畢赤酵母表達載體pHBM905C、pHBM906上,構(gòu)建了外切菊粉酶畢赤酵母表達載體pHBM1200、pHBM1201.將兩者轉(zhuǎn)化畢赤酵母GS115,得到重組菌株GS115(pHBM1200)、GS115(pHBM1201),將這兩種重組菌株進行搖瓶發(fā)酵,測得帶α-信號肽的菌株GS115(pHBM1200)表達的外切菊粉酶最高酶活為89.43 U/mL,帶自身信號肽的菌株GS115(pHBM1201)表達的外切菊粉酶最高酶活為14.828 U/mL.SDS-PAGE電泳表明,外切菊粉酶的表觀分子量為90 kD.將外切菊粉酶用去糖基化酶endoH處理后,SDS-PAGE電泳表明,分子量為60 kD,和預(yù)計的分子量一致.

作 者： 祝林 陳晶晶 舒望云 王博 馬立新 ZHU Lin CHEN Jing-jing SHU Wang-yun WANG Bo MA Li-xin   作者單位： 湖北大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,湖北,武漢,430062  刊 名： 湖北大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HUBEI UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE）  年，卷(期)： 2006 28(4)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： 外切菊粉酶   克魯維酵母   畢赤酵母   基因表達  

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