豬卵母細(xì)胞玻璃化冷凍后細(xì)胞骨架的變化

為研究玻璃化冷凍后豬卵母細(xì)胞紡錘體、染色體和微絲的變化,從屠宰豬卵巢表面直徑2-5 mm卵泡中采集未成熟(GV)期卵母細(xì)胞,由GV期卵母細(xì)胞經(jīng)成熟培養(yǎng)獲得體外成熟(MⅡ)期卵母細(xì)胞.GV期和MⅡ期卵母細(xì)胞各分為3組:對照組、冷凍保護(hù)劑處理組和玻璃化冷凍組.MⅡ期卵母細(xì)胞經(jīng)分組處理后直接用于激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)觀察樣本;而GV期卵母細(xì)胞處理后先經(jīng)44 h成熟培養(yǎng),再用作LSCM觀察樣本.供試卵母細(xì)胞經(jīng)固定、免疫熒光染色后,于LSCM下觀察.結(jié)果表明,冷凍保護(hù)劑處理組GV期卵母細(xì)胞經(jīng)成熟培養(yǎng)后,其紡錘體結(jié)構(gòu)、染色體排列與微絲分布正常率分別為42.9%、89.6%和28.6%;玻璃化冷凍組此3項(xiàng)指標(biāo)的正常率分別為10.1%、36.4%和16.9%,兩組間差異顯著(P＜0.05);除冷凍保護(hù)劑處理組染色體正常率與對照組無較大差異外,兩試驗(yàn)組的其他指標(biāo)均明顯低于對照組(分別為79.5%、93.1%和72.3%,P＜0.05).MⅡ期卵母細(xì)胞冷凍保護(hù)劑處理組的紡錘體結(jié)構(gòu)、染色體排列與微絲分布正常率分別為34.4%、61.3%和47.9%,而冷凍組分別為12.9%、56.7%和37.2%,兩組均顯著低于對照組(分別為78.3%、90.1%和72.8%,P＜0.05).結(jié)果表明,豬GV期和MⅡ期卵母細(xì)胞經(jīng)冷凍保護(hù)劑處理或玻璃化冷凍保存后,均造成了紡錘體、染色體和微絲不可逆的損傷,這可能是影響卵母細(xì)胞成熟、受精與發(fā)育的重要原因.

作 者： 武彩紅 芮榮 戴建軍 謝冰 劇世強(qiáng) 盧曉 WU Cai-hong RUI Rong DAI Jian-jun XIE Bing JU Shi-qiang LU Xiao   作者單位： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué),動物醫(yī)學(xué)院,江蘇,南京,210095  刊 名： 動物學(xué)研究  ISTIC PKU 英文刊名： ZOOLOGICAL RESEARCH  年，卷(期)： 2006 27(4)  分類號： Q959.842 Q952.4 Q245  關(guān)鍵詞： 豬   卵母細(xì)胞   玻璃化冷凍   細(xì)胞骨架   激光掃描共聚焦顯微鏡  

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