腺病毒介導EGFP基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細胞的實驗研究

目的 探討腺病毒(adenovirus)介導的增強型綠色熒光蛋白(EGFP)基因在神經(jīng)干細胞(NSCs)的表達規(guī)律及轉(zhuǎn)染對神經(jīng)干細胞增殖、分化的影響.方法 用不同感染復數(shù)的攜帶EGFP基因的腺病毒(Ad/EGFP)轉(zhuǎn)染NSCs,在熒光倒置相差顯微鏡下觀察EGFP的表達情況,同時用臺盼藍染色、細胞球計數(shù)、免疫細胞化學方法分別檢測對照組和轉(zhuǎn)染組細胞的活力、增殖、分化情況.結(jié)果 Ad/EGFP轉(zhuǎn)染16 h后NSCs發(fā)出綠色熒光,在第7天左右熒光強度達高峰并可持續(xù)穩(wěn)定表達20天左右,Nestin表達陽性.在分化后細胞的胞體與突起均可見綠色熒光,部分細胞β-Ⅲ tubulin、GFAP表達陽性.同時觀察到對照組和轉(zhuǎn)染組的NSCs在第7天、14天、21天時細胞活力、增殖、分化情況均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05).結(jié)論 Ad/EGFP可以高效轉(zhuǎn)染新生大鼠海馬NSCs,且不影響NSCs的存活、生長和分化.EGFP基因是神經(jīng)干細胞的理想的報告基因.

作 者： 歐陽長杰 趙玉 徐鐵軍 OUYANG Chang-jie ZHAO Yu XU Tie-jun   作者單位： 徐州醫(yī)學院解剖與神經(jīng)生物學教研室,江蘇,徐州,221002  刊 名： 徐州醫(yī)學院學報  ISTIC 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU  年，卷(期)： 2007 27(7)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： 神經(jīng)干細胞   腺病毒   增強型綠色熒光蛋白   轉(zhuǎn)染   基因表達  

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