親和層析法分離純化豬肺血管緊張素轉(zhuǎn)換酶

親和膠合成實(shí)驗(yàn)以雙環(huán)氧化合物1,4-丁二醇-2-縮水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)為活化體及連接臂,在硼氫化鈉(NaBH)存在的堿性條件下,將載體Sepharose CL―4B與雷諾普利(lisinopril)共價(jià)連接在一起,成功合成親和層析膠,并利用親和層析膠對(duì)豬肺血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensin converting enzyme, ACE)進(jìn)行分離提純.豬肺組織勻漿經(jīng)1.6～2.6 mol/L硫酸銨分級(jí)沉淀、透析平衡、親和柱分離等步驟,從200 g豬肺中提純得到0.79 mg ACE蛋白,酶活力回收11.9%,比活力38.8 U/mg.與層析前的酶液比較,親和層析一步提純可達(dá)264倍;與肺勻漿液比較提純達(dá)808倍.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳可見(jiàn),提純的豬肺ACE為一條帶,分子質(zhì)量約為180 ku.

作 者： 劉宏 陳蘭英 LIU Hong CHEN Lan-Ying   作者單位： 劉宏,LIU Hong(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院心血管病研究所,北京,100037)

陳蘭英,CHEN Lan-Ying(中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)阜外心血管病醫(yī)院,北京,100037) 

刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(5)  分類(lèi)號(hào)： Q503  關(guān)鍵詞： 親和層析膠制備   分離純化   血管緊張素轉(zhuǎn)換酶  

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