RNA干擾對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞分泌TNF-α的影響

目的:探討小干擾RNA(siRNA)對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞分泌的腫瘤壞死因子α(TNF-α)的抑制效果.方法:體外PCR擴(kuò)增合成針對(duì)TNF-α靶位點(diǎn)的DNA表達(dá)盒,轉(zhuǎn)染經(jīng)脂多糖(LPS)激活的小鼠脾淋巴細(xì)胞,在細(xì)胞內(nèi)源性RNA聚合酶Ⅲ作用下轉(zhuǎn)錄形成siRNA,誘發(fā)目標(biāo)mRNA的降解.于轉(zhuǎn)染后48 h收集細(xì)胞培養(yǎng)上清.TNF-α濃度用ELISA方法測(cè)定.結(jié)果:與空白對(duì)照組和無(wú)關(guān)干擾組相比,干擾組TNF-α分泌量明顯降低(P＜0.05),抑制率約為16%.結(jié)論:RNA干擾技術(shù)可以在原代培養(yǎng)的小鼠脾淋巴細(xì)胞中發(fā)揮特異性干擾作用,產(chǎn)生抑制TNF-α分泌的效果,為T(mén)NF-α的基因治療開(kāi)拓新途徑.

作 者： 鄭寧寧 丁旭東 宋曉宇 杜莉莉 孫杰 金玉楠 張海鵬 ZHENG Ning-ning DING Xu-dong SONG Xiao-yu DU Li-li SUN Jie JIN Yu-nan ZHANG Hai-peng   作者單位： 鄭寧寧,宋曉宇,杜莉莉,孫杰,金玉楠,張海鵬,ZHENG Ning-ning,SONG Xiao-yu,DU Li-li,SUN Jie,JIN Yu-nan,ZHANG Hai-peng(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室,遼寧,沈陽(yáng),110001)

丁旭東,DING Xu-dong(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院麻醉科,遼寧,沈陽(yáng),110001) 

刊 名： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 35(5)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： RNA干擾   小干擾RNA   轉(zhuǎn)錄后基因沉默   腫瘤壞死因子α  

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