白眉蝮蛇蛇毒糖基化蛋白的質(zhì)譜分析

[目的]蛋白質(zhì)組學方法分析和初步鑒定旅順產(chǎn)白眉蝮蛇(Gloydius blomhoffi Brevicaudus)蛇毒中的糖蛋白.[方法]SDS-PAGE用于白眉蝮蛇粗毒蛋白質(zhì)組份分離,糖蛋白凝膠熒光染料Pro-Q-Emerald染糖基化蛋白,采用胰蛋白酶酶解蛋白質(zhì),用反相C18-HPLC分離肽段混合物,用納升電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜(nESI-MS/MS)系統(tǒng)進行的質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集,蛋白質(zhì)鑒定用Biowroks軟件搜索NCBInr數(shù)據(jù)庫完成.[結果]旅順產(chǎn)白眉蝮蛇蛇毒L-氨基酸氧化酶、金屬蛋白酶、谷氨酰環(huán)化酶、salmobin、纖溶酶原激活物、contortrixobin、磷脂酶A2,神經(jīng)增長因子和較小分子量的L-氨基酸氧化酶被初步鑒定為糖蛋白,其匹配的肽段數(shù)分別為8、4、7、2、3、3、4、2和5個.L-氨基酸氧化酶的純化與表征結果驗證了其糖基化,并以多種糖基化形式存在.[結論]采用蛋白質(zhì)組學手段從旅順產(chǎn)白眉蝮蛇蛇毒中鑒定出了8種糖蛋白,該方法簡便、快速、準確.

作 者： 張翠麗 劉淑清 孫明忠 辛毅 趙寶昌 ZHANG Cui-li LIU Shu-qing SUN Ming-zhong XIN Yi ZHAO Bao-chang   作者單位： 張翠麗,孫明忠,辛毅,ZHANG Cui-li,SUN Ming-zhong,XIN Yi(大連醫(yī)科大學生物技術專業(yè),遼寧大連,116044)

劉淑清,趙寶昌,LIU Shu-qing,ZHAO Bao-chang(大連醫(yī)科大學,基礎醫(yī)學院,生物化學與分子生物學教研室,遼寧大連116044) 

刊 名： 大連醫(yī)科大學學報  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF DALIAN MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2008 30(3)  分類號： Q53  關鍵詞： 蛇毒   糖基化   Pro-Q-Emerald   電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜  

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