胞漿蛋白提取方法

時(shí)間：2023-05-01 06:31:15 資料我要投稿

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胞漿蛋白提取方法

胞漿蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品組成：

產(chǎn)品組成規(guī)格胞漿蛋白提取液蛋白酶抑制劑混合物

BB-3113-1

50T 10ml 100ul

BB-3113-2 100T 20ml 200ul

儲(chǔ)存條件：

-20℃保存。

有效期：

一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒提供配套試劑，適用于從細(xì)胞和動(dòng)物組織制備胞漿蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的胞漿蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活性測(cè)定等蛋白研究。

使用方法：

A．細(xì)胞蛋白提取

1. 取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，500×g條件下離心2-3分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，

盡可能吸干，收集細(xì)胞。

2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

3. 每20ul細(xì)胞壓積中加入200μl冷的胞漿蛋白提取液，2ul蛋白酶抑制劑混合物，

高速渦旋振蕩15秒，置冰上10分鐘。

4. 再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，16000×g條件下離心5分鐘。

5. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到胞漿蛋白，請(qǐng)置于冰上或-80

℃冰箱保存?zhèn)溆谩?B．組織蛋白提取

1. 取適量組織樣本剪碎，加冷PBS，用組織勻漿器勻漿至無(wú)明顯肉眼可見(jiàn)固體（或

用液氮研磨），冰上靜置5分鐘，小心將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管。 2. 在4℃，500×g條件下離心2-3分鐘，棄上清。